Nel 1995 Ami Ōnuki realizzò un demo per la Sony Music Japan, mentre l'amica Yumi Yoshimura realizzò un'audizione per una compagnia che cercava cantanti e attori. La Sony decise di unire le ragazze in un gruppo, chiamato Puffy AmiYumi, che debuttò nel 1996 e riscosse un ottimo successo di pubblico.[1]
Insieme alla Yoshimura, Ami Ōnuki ha diretto il programma televisivo Pa-Pa-Pa-Pa-Puffy e il reality show Hi Hi Puffy Bu. Dal 2004 al 2006 è stata realizzata una serie animata sulle avventure del duo, intitolata Hi Hi Puffy AmiYumi.
Nel 2002 interpretò un ruolo nel thriller Copycat Killer.
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